準備物品：

清理液（A）                                   毫升

染色液（t B）                                   微升

稀釋液（C）                                   毫升

溶解液（tD）                                   毫升

產(chǎn)品說明書                                   1份

普通PCR反應流程：

組成及試劑配制:

1、酶標板：一塊（96孔）

2、 標準品（凍干品）： 2瓶，請臨用前15分鐘內配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml，蓋好后室溫靜置大約10分鐘，同時反復顛倒/搓動以助溶解，其濃度為200 U/L，然后做系列倍比稀釋（注：不要直接在板中進行倍比稀釋），分別配制成200 U/L，100 U/L，50 U/L，25 U/L，12.5 U/L，6.25 U/L，3.12 U/L，樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標準品：取0.3ml （不要少于0.3ml ）200 U/L的上述標準品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中，混勻即可，其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液：1×20ml。

4、 檢測稀釋液A：1×10ml。

5、 檢測稀釋液B：1×10ml。

反應五要素：

產(chǎn)堿普羅威登斯菌PCR檢測試劑盒參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物：引物是PCR特異性反應的關鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列， 就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。設計引物應遵循以下原則：

①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。

②引物擴增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴增長至10kb的片段。

③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內部出現(xiàn)二級結構，避免兩條引物間互補，特別是3'端的互補，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴增條帶。

⑤引物3'端的堿基，特別是最末及倒數(shù)第二個堿基，應嚴格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點， 被擴增的靶序列*有適宜的酶切位點， 這對酶切分析或分子克隆很有好處。

⑦引物的特異性：引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。

引物量：每條引物的濃度0.1～1umol或10～100pmol，以*引物量產(chǎn)生所需要的結果為好，引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴增，且可增加引物之間形成二聚體的機會。

使用方法 ：   

1 實驗所需器材與試劑

1.1 器材

1）PCR儀

2）PCR反應管

3）電泳儀及水平電泳槽

4）高速離心機

5）微量移液器及移液器吸頭

1.2 試劑

1）瓊脂糖

2）EB（溴化乙錠）

3）去離子水或雙蒸水

注意事項：   

5.1使用本試劑前請仔細閱讀本說明書全文。

5.2 操作時應盡量少說話，因口腔中也含有支原體，可能引起樣品污染，而造成假陽性；整個檢測過程中，反應體系的配制、樣本處理及加樣、PCR擴增應分區(qū)域進行，以避免交叉污染。 5.3 實驗時，試劑盒組分中的試劑使用前應充分融化并混勻（混勻時禁止激烈振蕩，只需要進行上下倒置多次進行混勻）。

5.4 反應管中加好所有的試劑后，應盡快上PCR儀進行擴增，以免形成過多的二聚體。

5.5細胞培養(yǎng)物中含有青霉素和鏈霉素等抗生物素不會影響本品的檢測結果。如果用戶需要進一步提高檢測靈敏度，建議細胞在不含青霉素和鏈霉鏈等抗生素中進行培養(yǎng)2-3天后送樣檢測。

(R型)人參皂苷Rg2 訂購|咨詢 PLGF ELISA Kit  大鼠胎盤生長因子 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg

木香烴內酯 訂購|咨詢 ssDNA(human single stranded DNA Antibody) ELISA Kit  人抗單鏈DNA抗體/變性DNA抗體 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg

竹節(jié)香附素A 訂購|咨詢 Human histone H2A-H2B-DNA autoantibody ELISA Kit  人抗組蛋白(H2A-H2B)-DNA抗體/抗二聚體-DNA抗體 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg

五味子乙 訂購|咨詢 RANTES/CCL5 ELISA kit   大鼠正常T細胞表達和分泌因子 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg

(+)-兒茶素 訂購|咨詢 dsDNA(Human anti-double stranded DNA) ELISA KIT  人抗雙鏈DNA抗體/天然DNA抗體 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg

沒食子 訂購|咨詢 PAL ELISA Kit  大鼠L解酶 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg

冬凌草素 訂購|咨詢 AnuA-IgG(Human anti-nucleosome antibody IgG) ELISA Kit  人抗核小體抗體IgG 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg

黃芩苷 訂購|咨詢 sCD30L ELISA Kit  大鼠可溶性CD30配體 規(guī)格： HPLC≥98%;20mg

 訂購|咨詢 sCD40L ELISA Kit  大鼠可溶性CD40配體 規(guī)格： 20mg

芹糖甘草苷 訂購|咨詢 SCL70/topo I (Human anti-scl70 antibody) ELISA Kit  人抗抗體70 規(guī)格： 10mg

五味子 訂購|咨詢 Human SS-B/La Antibody ELISA Kit  人抗SS-B/La抗體 規(guī)格： 20mg

茵芋堿 訂購|咨詢 SCFR ELISA Kit  大鼠干細胞因子受體 規(guī)格： 20mg

銀杏內酯A 訂購|咨詢 SDF-1 Beta/CXCL12 ELISA Kit  大鼠基質細胞衍生因子1β 規(guī)格： 20mg

熊果苷 訂購|咨詢 PF(Human Pemphigus Foliaceus) ELISA Kit  人落葉型天皰瘡抗體 規(guī)格： 20mg

松果菊苷 訂購|咨詢 Beta2-GP1 Ab IgA(Human Beta2-Glycoprotein 1 antibody IgA) ELISA Kit  人β2糖蛋白1抗體IgA 規(guī)格： 20mg

石杉堿 訂購|咨詢 ANG-R-Tie1 ELISA Kit  大鼠生成素受體Tie1 規(guī)格： 20mg

擬人參皂苷F11 訂購|咨詢 ACA-IgA(Human anti-cardiolipin antibody IgA) ELISA Kit  人抗心磷脂抗體IgA 規(guī)格： 20mg

α-蒎（95%） 訂購|咨詢 Tie-2 ELISA Kit  大鼠含免疫球蛋白樣環(huán)和上皮生長因子樣域酪激酶2 規(guī)格： 20mg
產(chǎn)堿普羅威登斯菌PCR檢測試劑盒Squalene Epoxidase  鯊烯環(huán)氧酶抗體 Human Osteocalcin ELISA Kit 規(guī)格: 96T/48T 原裝、分裝

MACC1  轉移相關蛋白1抗體 Human substance P receptor ELISA Kit 規(guī)格: 96T/48T 原裝、分裝

NRXN3  軸突蛋白3抗體 Human calcitonin gene related peptide ELISA Kit 規(guī)格: 96T/48T 原裝、分裝

Neprilysin 2  腦啡肽酶2抗體 Human Actinin α ELISA Kit 規(guī)格: 96T/48T 原裝、分裝

Netrin G2  軸突生長誘向因子G2抗體 Human Bone morphogenetic protein 7 ELISA Kit 規(guī)格: 96T/48T 原裝、分裝

Neurexin 2  軸突蛋白2抗體 U.S. Salmon. CT. ELISA Kit 規(guī)格: 96T/48T 原裝、分裝

Ninjurin 1  神經(jīng)損傷誘導蛋白1抗體 Human Vitamin D Receptor ELISA Kit 規(guī)格: 96T/48T 原裝、分裝

Ninjurin 2  神經(jīng)損傷誘導蛋白2抗體 Human I-PTH ELISA Kit 規(guī)格: 96T/48T 原裝、分裝