實驗注意事項：

1）RT-PCR可以檢測組織、細(xì)胞、血液、細(xì)菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認(rèn)實驗方案和樣本情況；

2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準(zhǔn)確的名稱和ID號；

3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。

4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。

技術(shù)原理:

DNA的半保留復(fù)制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動子的參與下，根據(jù)堿基互補配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。

在聚合酶鏈?zhǔn)椒磻?yīng)實驗中發(fā)現(xiàn)，DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈，當(dāng)溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性，并設(shè)計引物做啟動子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。（ DNA高溫變性低溫復(fù)性）

發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個循環(huán)加酶，使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本，PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用，并逐步應(yīng)用于臨床。

使用及效果：

將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子（約1/4 黃豆大小）或直徑約為0.5-0.7 cm（或面積相當(dāng)?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中，95℃保溫10-15 分鐘，加入0.1 mL 溶液B，混勻，直接取上清液（相當(dāng)于PCR 體積的1/10）作為模板進行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。

實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，*通過標(biāo)準(zhǔn)曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細(xì)胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。

主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達(dá)差異分析、基因分型。

主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR

PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：

①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；

②堿基配對原則；

③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性；

④靶基因的特異性與保守性。

其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。

(2) 靈敏度高

PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位)；在細(xì)菌學(xué)中zui小檢出率為3個細(xì)菌。

(3) 簡便、快速

PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。

(4) 對標(biāo)本的純度要求低

不需要分離病毒或細(xì)菌及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板?？芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

馬拉韋若   進口/國產(chǎn)  規(guī)格：>99%純度：≥98%  

群勃龍醋    進口/國產(chǎn)  規(guī)格：>98%,BR,可用于細(xì)胞培養(yǎng)純度：≥98%  

水飛薊賓(標(biāo)準(zhǔn)品)   進口/國產(chǎn)  規(guī)格：HPLC>97%，標(biāo)準(zhǔn)品純度：≥98%

水飛薊賓   進口/國產(chǎn)  規(guī)格：>97%,BR純度：≥98%  

依澤替米貝;依折麥布   進口/國產(chǎn)  規(guī)格：>99%純度：≥98%  

依澤替米貝;依折麥布(標(biāo)準(zhǔn)品)   進口/國產(chǎn)  規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品純度：≥98%

鹽哌卡因   進口/國產(chǎn)  規(guī)格：>99%,BR純度：≥94%  

安普韋    進口/國產(chǎn)  規(guī)格：>97%純度：≥98%  

魯比替康; 9基喜樹堿   進口/國產(chǎn)  規(guī)格：>99%純度：≥95%  

泊洛沙姆407   進口/國產(chǎn)  規(guī)格：M.W12000，進口BASF分包純度：98%

酒石長春質(zhì)堿   進口/國產(chǎn)  規(guī)格：>95%,BR純度：≥98%

長春質(zhì)堿   進口/國產(chǎn)  規(guī)格：>98%,BR純度：≥95%

長春質(zhì)堿(標(biāo)準(zhǔn)品)   進口/國產(chǎn)  規(guī)格：>98%,標(biāo)準(zhǔn)品純度：≥97%  

康普瑞汀   進口/國產(chǎn)  規(guī)格：>99%,細(xì)胞培養(yǎng)級純度：≥98%  

土霉素   進口/國產(chǎn)  規(guī)格：≥95%,BR純度：≥98%  

土霉素(進分)   進口/國產(chǎn)  規(guī)格：930u/mg,進分純度：≥98%  

Brk/PTK6  酪氨蛋白激酶6(激酶)    特價促銷 0.2ml Gabexate mesylate

CrkRS/CRK7  細(xì)胞分裂周期2相關(guān)蛋白激酶7一抗    特價促銷 0.2ml Gabexate mesylate

phosphoMCK10/CD167a/DDR1(Tyr513)  化神經(jīng)上皮酪氨激酶一抗（癌激酶10）    特價促銷 0.1ml Dexamethasone

Ret/HSCR1  原癌基因酪氨蛋白激酶受體RET/多發(fā)性腺瘤和狀腺髓樣癌蛋白一抗    特價促銷 0.1ml Dexamethasone

phosphoRet/HSCR1(Tyr1062)  化原癌基因酪氨蛋白激酶受體RET一抗    特價促銷 0.1ml Diltiazem HCL

LDHD  乳脫酶D一抗    特價促銷 0.2ml Diltiazem HCL

ENO1+ENO2+ENO3  神經(jīng)元，肌肉特異性化酶一抗    特價促銷 0.2ml Dimesna

AKR1B10  醛糖還原酶相關(guān)蛋白質(zhì)一抗    特價促銷 0.2ml Dolasetron mesylate
沉香探針法PCR鑒定試劑盒免費代測性狀: 白色結(jié)晶粉末

規(guī)格: 20mg/50mg/1g，可按客戶需求包裝！

用途: 用于科研研究、鑒定、藥理實驗等

熔點: 212-218℃

溶解性: 可溶于甲醇、乙醇、DMSO等有機溶劑

提取來源: 柴胡地上部分

: 具有，，，，及的作用

鑒別方法: NMR；Ms

檢測方法: HPLC-ELSD 乙腈-水梯度脫洗

貯存條件: 低溫冷藏，避光，密封，干燥

注意事項: 補充中

有效期限: 2年

供貨能力: 現(xiàn)貨，可根據(jù)可以客戶需求批量定制生產(chǎn)