實驗注意事項：

1）RT-PCR可以檢測組織、細胞、血液、細菌等很多材料，不同的樣本有不同要求，實驗前請充分溝通確認實驗方案和樣本情況；

2）客戶盡可能提供實驗的背景信息、物種、基因準確的名稱和ID號；

3）客戶盡量不要提供DNA或RNA樣品。

4）樣本保存于液氮或干冰，也可以保存于Trizol液中。

技術(shù)原理:

DNA的半保留復(fù)制是生物進化和傳代的重要途徑。雙鏈DNA在多種酶的作用下可以變性解鏈成單鏈，在DNA聚合酶與啟動子的參與下，根據(jù)堿基互補配對原則復(fù)制成同樣的兩分子挎貝。

在聚合酶鏈式反應(yīng)實驗中發(fā)現(xiàn)，DNA在高溫時也可以發(fā)生變性解鏈，當溫度降低后又可以復(fù)性成為雙鏈。因此，通過溫度變化控制DNA的變性和復(fù)性，并設(shè)計引物做啟動子，加入DNA聚合酶、dNTP就可以完成特定基因的體外復(fù)制。（ DNA高溫變性低溫復(fù)性）

發(fā)現(xiàn)耐熱DNA聚合同酶--Taq酶對于PCR的應(yīng)用有里程碑的意義，該酶可以耐受90℃以上的高溫而不失活，不需要每個循環(huán)加酶，使PCR技術(shù)變得非常簡捷、同時也大大降低了成本，PCR技術(shù)得以大量應(yīng)用，并逐步應(yīng)用于臨床。

使用及效果：

將壓碎的一小片重量約在100 mg 左右的植物種子（約1/4 黃豆大?。┗蛑睆郊s為0.5-0.7 cm（或面積相當?shù)钠渌螤睿┑闹参锶~片直接加到新鮮配制的0.1 mL溶液A 中，95℃保溫10-15 分鐘，加入0.1 mL 溶液B，混勻，直接取上清液（相當于PCR 體積的1/10）作為模板進行PCR。剩余樣品可以放4℃保存。

實時熒光定量PCR（quantitative real-time PCR，qPCR）是指在PCR反應(yīng)體系中加入熒光基團，利用熒光信號積累實時監(jiān)測整個PCR進程，*通過標準曲線對未知模板進行定量分析的方法。實時熒光定量PCR的化學(xué)原理包括探針類和非探針類兩類，探針類是利用與靶細胞序列特異性雜交的探針來指示擴增產(chǎn)物的增加，非探針類是利用熒光染料或者特異性設(shè)計的引物來指示擴增的增加。運用該技術(shù)可以對DNA、RNA樣品進行定量（包括*定量和相對定量）和定性分析。

主要服務(wù)：DNA或RNA的*定量分析、基因表達差異分析、基因分型。

主要技術(shù)：引物設(shè)計、RNA提取、cDNA合成、qPCR

PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：

①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；

②堿基配對原則；

③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性；

④靶基因的特異性與保守性。

其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。

(2) 靈敏度高

PCR產(chǎn)物的生成量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位)；在細菌學(xué)中zui小檢出率為3個細菌。

(3) 簡便、快速

PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。

(4) 對標本的純度要求低

不需要分離病毒或細菌及培養(yǎng)細胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板?？芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。

甲醇中氟嗎啉溶液標準樣品 1mL Aspergillus ochraceus赭曲霉PCR試劑盒

甲醇中猛殺威溶液標準樣品 1ml Aspergillus ochraceus赭曲霉染料法熒光定量PCR試劑盒

甲醇中燕麥敵溶液標準樣品 1ml Aspergillus ochraceus赭曲霉探針法熒光定量PCR試劑盒

甲醇中土菌靈溶液標準樣品 1ml Aspergillus parasiticus寄生曲霉PCR試劑盒

甲醇中吡螨胺溶液標準樣品 1ml Aspergillus parasiticus寄生曲霉染料法熒光定量PCR試劑盒

正己烷中苯胺靈溶液標準樣品 1ml Aspergillus parasiticus寄生曲霉探針法熒光定量PCR試劑盒

丙酮中氟喹唑溶液標準樣品 1ml Aspergillus spp. 曲霉屬通用PCR試劑盒

甲醇中乙氧氟草醚溶液標準樣品 1ml Aspergillus spp. 曲霉屬通用染料法熒光定量PCR試劑盒

甲醇中咯菌腈溶液標準樣品 1ml Aspergillus spp. 曲霉屬通用探針法熒光定量PCR試劑盒

甲醇中抑菌靈溶液標準樣品 1ml Astrovirus(AV)星狀病毒RT-PCR試劑盒

甲醇中雙苯氟脲溶液標準樣品（氟酰脲） 1ml Astrovirus(AV)星狀病毒染料法熒光定量RT-PCR試劑盒

甲醇中微囊藻毒素RR溶液標準樣品 1ml Astrovirus(AV)星狀病毒探針法熒光定量RT-PCR試劑盒

水中靛藍溶液標準樣品 5ml Aujeszky's Disease Virus(ADV)奧葉茲基氏病病毒PCR試劑盒

甲醇中烯草酮溶液標準樣品 1ml Aujeszky's Disease Virus(ADV)奧葉茲基氏病病毒染料法熒光定量PCR試劑盒

正己烷中苯酰菌胺溶液標準樣品 1ml Aujeszky's Disease Virus(ADV)奧葉茲基氏病病毒探針法熒光定量PCR試劑盒
伸筋草LAMP鑒定試劑盒廠家維生素K1/葉綠醌/2-甲基-3-植醇基-1，4-萘醌/植物甲萘醌/2-甲基-3-(3,7,11,15-四甲基十六-2-烯基)-1,4-萘醌/VK1BR，98%1克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，84-80-02～8℃，避光

5克，Sigma-Aldrich、Amresco、Amersham、Serva、AppliChem等品牌，

中文名稱： 維生素K1

其他名稱： 葉綠醌；2-甲基-3-植醇基-1，4-萘醌；植物甲萘醌；2-甲基-3-(3,7,11,15-四甲基十六-2-烯基)-1,4-萘醌

英文名稱： VK1

其他名稱： Phylloquinone；Vitamin K1；3-Phytylmenadione；Vitamin K1(20)；Phytonadione；Aquamephyton；Konakion；Monokay；Veda-K１

產(chǎn)品規(guī)格： BR，98%

包裝：1克/5克/25克/100克

CAS號：84-80-0

C31H46O2=450.7

級別：BR

含量：≥98.0%

鑒別：合格

折光率Refractive index ：～1.526

Acid value：≤2.0mg

性狀：黃色黏性油狀液體。對光敏感，對空氣和濕穩(wěn)定，能被氫氧化堿溶液和還原劑破壞。溶于乙醇、丙酮、苯、已烷、二氧六環(huán)、、植物油和其他脂肪溶劑，微溶于甲醇，不溶于水。相對密度0.984。比旋光度-0.28o二氧六環(huán)）。*吸收波長242，248，260，269，325cm（E1%1cm396，419，383，387，68）。閃點>110℃。

用途：生化研究。代謝功能和作用機制的研究。

保存：2～8℃，避光