需自備試劑和器材：

1． 標(biāo)準(zhǔn)規(guī)格酶標(biāo)儀。

2． 自動洗板機(jī)。

3.  37℃恒溫箱。

4． 系列可調(diào)節(jié)移液器及吸頭，一次檢測樣品較多時用多通道移液器。

5． 干凈的試管和 Eppendof 管。

6． 使用中性 PBS 或 TBS 作為洗滌液。0.01M TBS   配法為：1000ml H2O 中加 Tris 1.2g, NaCl 8.5g; 純乙酸 450μ l 或濃鹽酸 700μ l 左右調(diào)節(jié) pH 值(7.2-7.6)。

0.01 M PBS（pH7.2-7.6）  配法：1000ml 蒸餾水中加氯化鈉 8.5g, Na2HPO4 1.4g, NaH2PO4 0.2g。如果用的是含水磷酸鹽，應(yīng)加上分子式中水的含量。

9.  蒸餾水

10. 吸水紙 

產(chǎn)品名稱：小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)ELISA檢測試劑盒

英文名稱：TIMP-3

規(guī)格：96T/48T

特點：靈敏性高、特異性強(qiáng)、重復(fù)性好

用途:科研實驗等領(lǐng)域科學(xué)研究，產(chǎn)品僅用于科研不得用于臨床診斷

運(yùn)輸:快遞(根據(jù)客戶要求，選擇具體的運(yùn)輸方式)

試劑盒種屬：羊、雞、鴨、魚、人、大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛等動植物。

待檢樣本：體液、血清、血漿、細(xì)胞培養(yǎng)上清液、尿液、組織勻漿、心房水標(biāo)本等等

實驗步驟:

石蠟包埋組織切片 3~4μm 厚度 

1.烤片： 將待做切片置于切片架上，于 60℃恒溫烤箱中至少烤 1 hr； 

2.脫蠟： 切片放入盛有二甲苯的容器中脫蠟 3 次（即二甲苯Ⅰ、Ⅱ、Ⅲ），每次

10 min； 

3.水化： 切片經(jīng)下行酒精水化，無水乙醇 5min，95%乙醇 2 次（每次 2min），85%

乙醇 2 min；75%乙醇 2min，自來水沖洗，ddH2O 洗 2×2min； 

4.抗原修復(fù)： 根據(jù)抗體說明書推薦方法進(jìn)行抗原修復(fù)，常采用高壓、微波（溫

度達(dá)到 98~100℃）或酶消化修復(fù)法，室溫自然冷卻，自來水沖洗，ddH2O 洗 2×

2min，TBS 洗滌（2×2min）（具體修復(fù)方法見附 1）* 注：有些抗原勿需修復(fù)，

直接進(jìn)入第 5 步封閉。 

5.封閉： 滴加試劑 B，37℃濕盒孵育 30 min； 

6.加一抗：滴加用試劑 C（即用型一抗），37℃濕盒孵育 2 hr 或 4℃過夜； 

7.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）； 

8.封閉： 滴加試劑 B，37℃濕盒孵育 10 min； 

9.加二抗： 滴加用抗體稀釋液稀釋的生物素化二抗（試劑 D），37℃濕盒中孵育

30 min； 

10.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min）； 

11.封閉： 滴加試劑 Tween 20，37℃濕盒孵育封閉 20 min； 

12.加 HRP-SA： 滴加用試劑 C 稀釋的試劑 E（1：50~200，終濃度 5~20 nM），37

℃濕盒中孵育 30 min； 

13.洗滌： TBS-T 洗滌（3×5 min），TBS 洗滌（2×5 min）； 

14.顯色：應(yīng)用 DAB 溶液（試劑 F）顯色； 

15.復(fù)染：自來水充分沖洗，復(fù)染，脫水，透明； 

16.封片： 待組織標(biāo)本干后，用試劑緩沖甘油封固劑封片； 

17.觀察成像： 顯微鏡下觀察成像。

非受體型蛋白酪氨酸磷酸酶7抗體AQP-4(Aquaporin-4) ELISA KitAlias: AQP-4(Aquaporin-4)|AQP4|HMIWC2|MIWC|WCH4ELISAKitReactivity: HumanRange: 0.313-20ng/mlSensitivity: 0.188ng/ml

磷酸化非受體型蛋白酪氨酸磷酸酶7抗體AQP5(Aquaporin-5) ELISA KitAlias: AQP5|AQP-5|Aquaporin5ELISAKitReactivity: HumanRange: 0.156-10ng/mlSensitivity: 0.094ng/ml

磷酸化蛋白激酶C(T410)抗體CCND1(G1/S-specific cyclin-D1) ELISA KitAlias: CCND1|BCL-1|PRAD1oncogene|B-celllymphoma1protein|BCL-1oncogene|BCL1|PRAD1|Cyclin-D1|Cyl-1|cyclinD1|G1|S-specificcyclinD1|G1|S-specificcyclin-D1|PRAD1B-cellCLL|lymphoma1ELISAKitReactivity: HumanRange: 0.313-20ng/mlSensitivity: 0.188ng/ml

前列腺癌相關(guān)蛋白4抗體SST(Somatostatin) ELISA KitAlias: SST|SMST|SOM|SRIF|Growthhormonerelease-inhibitingfactor|somatostatin-14|somatostatin-28ELISAKitReactivity: HumanRange: 7.813-500pg/mlSensitivity: 4.688pg/ml

線粒體導(dǎo)肽水解酶β抗體FBN1(Fibrillin-1) ELISA KitAlias: FBN1(Fibrillin-1)|FBNELISAKitReactivity: HumanRange: 0.313-20ng/mlSensitivity: 0.188ng/ml

富含脯氨酸蛋白15抗體PKM2(Pyruvate kinase isozymes M1/M2) ELISA KitAlias: PKM2(PyruvatekinaseisozymesM1|M2)|CTHBP|OIP3|p58|PK2|PK3|TCB|THBP1|TumorM2-PK|Cytosolicthyroidhormone-bindingprotein|OIP-3|Opa-interactingprotein3|PK|muscletype|Pyruvatekinase2|3|Pyruvatekinasemuscleisozyme|TCB|Thyroidhormone-bindingprotein1ELISAKitReactivity: HumanRange: 78.125-5000pg/mlSensitivity: 46.875pg/ml

香葉烯基轉(zhuǎn)移酶1β抗體GZMA(Granzyme A) ELISA KitAlias: GZMA(GranzymeA)|CTLTryptase|CTLA3|Fragmentin-1|HF|HFSP|CytotoxicT-lymphocyteproteinase1|Granzyme-1|Hfactor|HanukkahfactorELISAKitReactivity: HumanRange: 15.625-1000pg/mlSensitivity: 9.375pg/ml

N-乙酰基轉(zhuǎn)移酶2抗體NGB(Neuroglobin) ELISA KitAlias: NGB(Neuroglobin)ELISAKitReactivity: HumanRange: 0.156-10ng/mlSensitivity: 0.094ng/ml

Rho鳥甘酸轉(zhuǎn)運(yùn)蛋白抗體PICP(C-terminal propeptide of Collagen alpha-1(I) chain) ELISA KitAlias: PICP|C-PropeptideOfTypeIProcollagenELISAKitReactivity: HumanRange: 62.5-4000pg/mlSensitivity: 37.5pg/ml

維生素K依賴的蛋白C輕鏈抗體IMPA2(Inositol monophosphatase 2) ELISA KitAlias: IMPA2(Inositolmonophosphatase2)|IMP2|IMPase2|Inositol-1(or4)-monophosphatase2|Myo-inositolmonophosphataseA2ELISAKitReactivity: HumanRange: 62.5-4000pg/mlSensitivity: 37.5pg/ml

絲氨酸蛋白酶2抗體CARTPT(Cocaine-and amphetamine-regulated transcript protein) ELISA KitAlias: CARTPT|CART|CARTprepropeptide|cocaineandamphetamineregulatedtranscript|cocaine-andamphetamine-regulatedtranscriptproteinELISAKitReactivity: HumanRange: 78.125-5000pg/mlSensitivity: 46.875pg/ml

巰基氧化酶1抗體COL1A1(Collagen Type I Alpha 1) ELISA KitAlias: COL1α1|COL1A1(CollagenTypeIAlpha1)|Alpha-1typeIcollagen|OI4|Collagen1|collagenalpha1chaintypeI|Collagen1|Collagen-1|OI4|pro-alpha-1collagentype1ELISAKitReactivity: HumanRange: 0.313-20ng/mlSensitivity: 0.188ng/ml

神經(jīng)內(nèi)分泌肽QRFP抗體PTTG2(Securin-2) ELISA KitAlias: PTTG2(Securin-2)|Pituitarytumor-transforminggene2proteinELISAKitReactivity: HumanRange: 6.25-400pg/mlSensitivity: 3.75pg/ml

RNA結(jié)合蛋白QK1抗體COL2A1(Collagen alpha-1(II) chain) ELISA KitAlias: COL2α1|COL2A1|ANFH|AOM|COL11A3|SEDC|Chondrocalcin|Alpha-1typeIIcollagen|cartilagecollagen|Collagen2|collagenalpha-1(II)chain|collagenII|alpha-1polypeptide|collagentype2|Collagen-2ELISAKitReactivity: HumanRange: 0.625-40ng/mlSensitivity: 0.375ng/ml

喹啉酸磷酸核糖基轉(zhuǎn)移酶抗體PTTG1IP(Pituitary tumor-transforming gene 1 protein-interacting protein) ELISA KitAlias: PTTG1IP(Pituitarytumor-transforminggeneprotein-bindingfactor)|PBF|PTTG-bindingfactorELISAKitReactivity: HumanRange: 0.156-10ng/mlSensitivity: 0.094ng/ml
小鼠基質(zhì)金屬蛋白酶抑制因子3(TIMP-3)ELISA檢測試劑盒硫酸魚精蛋白溶液(1%)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液CAS NO.:  分 子 式:  分 子 量:

新烏頭原堿化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品CAS NO.:  分 子 式:  分 子 量: 儲存條件:  2-8℃

三七皂苷R2(R型)20(R)-Notoginsenoside R2中藥標(biāo)準(zhǔn)品 CAS NO.: 948046-15-9 分 子 式: C41H70O13 分 子 量: 770.998

野漆樹苷4H-1-Benzopyran-4-one,7-[[2-O-(6-deoxy-偽-L-mannopyranosyl)-尾-D-glucopyranosyl]oxy]-5-hydroxy-2-(4-hydroxyphenyl)-中藥標(biāo)準(zhǔn)品 CAS NO.: 17306-46-6 分 子 式: C27H30O14 分 子 量: 578.5187

Tris抗原修復(fù)液(10×,pH9.5)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液CAS NO.:  分 子 式:  分 子 量:

堿性品紅水溶液(1%)標(biāo)準(zhǔn)滴定溶液CAS NO.:  分 子 式:  分 子 量:

藜蘆醇Veratryl alcohol中藥標(biāo)準(zhǔn)品 CAS NO.: 93-03-8 分 子 式: C9H12O3 分 子 量: 168.18978儲存條件:  2-8℃檢測方法:  HPLC≥98%

豆腐果新苷BHelicianeoide B化學(xué)標(biāo)準(zhǔn)品CAS NO.: 496066-89-8 分 子 式: C32H38O20 分 子 量: 742.632120000001儲存條件:  2-8℃外觀:  Yellow powder
樣本處理及要求：

1. 血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。

仔細(xì)收集上清，保存過程中如出現(xiàn)沉淀，應(yīng)再次離心。

2. 血漿：應(yīng)根據(jù)標(biāo)本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)該再次離心。

3. 尿液：用無菌管收集，離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清，保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。胸腹水、腦脊液參照實行。

4. 細(xì)胞培養(yǎng)上清：檢測分泌性的成份時，用無菌管收集。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。檢測細(xì)胞內(nèi)的成份時，用PBS（PH7.2-7.4）稀釋細(xì)胞懸液，細(xì)胞濃度達(dá)到100萬/ml左右。通過反復(fù)凍融，以使細(xì)胞破壞并放出細(xì)胞內(nèi)成份。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。保存過程中如有沉淀形成，應(yīng)再次離心。

5. 組織標(biāo)本：切割標(biāo)本后，稱取重量。加入一定量的PBS，PH7.4。用液氮迅速冷凍保存?zhèn)溆谩?biāo)本融化后仍然保持2-8℃的溫度。加入一定量的PBS（PH7.4），用手工或勻漿器將標(biāo)本勻漿充分。離心20分鐘左右（2000-3000轉(zhuǎn)/分）。仔細(xì)收集上清。分裝后一份待檢測，其余冷凍備用。

6. 標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取，提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行，提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗，可將標(biāo)本放于-20℃保存，但應(yīng)避免反復(fù)凍融.

7. 產(chǎn)品僅用于科研不能檢測含NaN3的樣品，因NaN3抑制辣根過氧化物酶的（HRP）活性。