上海烜雅生物科技有限公司
店齡5年 · 企業(yè)認證 · 上海市奉賢區(qū)
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牛乙酰輔酶A羧化酶(ACC)ELISA檢測試劑盒
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上海市奉賢區(qū)
牛乙酰輔酶A羧化酶(ACC)ELISA檢測試劑盒組成:
名稱 | 96孔配置 | 48孔配置 |
微孔酶標板 | 12孔×8條 | 12孔×4條 |
標準品 | 0.3mL*6管 | 0.3mL*6管 |
樣本稀釋液 | 6mL | 3mL |
檢測抗體-HRP | 10mL | 5mL |
20×洗滌緩沖液 | 25mL | 15mL |
底物A | 6mL | 3mL |
底物B | 6mL | 3mL |
終止液 | 6mL | 3mL |
封板膜 | 2張 | 2張 |
說明書 | 1份 | 1份 |
自封袋 | 1個 | 1個 |
實驗原理:
將目標抗體包被于96孔微孔板中,制成固相載體,向微孔中分別加入標準品或標本,其中的目標連接于固相載體上的抗體結(jié)合,然后加入微生物化的目標抗體,將未結(jié)合的生物素抗體洗凈后,加入HRP標記和親和素,再次徹底洗滌后加入TMB底物顯色。TMB在過氧化物酶的催化下轉(zhuǎn)化成藍色,并在酸的作用下轉(zhuǎn)化成最終的黃色。顏色的深淺和樣品中的目標呈正相關。用酶標儀在450nm波長下測定吸光度(O.D.值),計算樣品濃度。
中文名稱:牛乙酰輔酶A羧化酶(ACC)ELISA檢測試劑盒
種屬:牛
規(guī)格:96T/48T
價格:電詢
說明書:請直接向我司客服索取
結(jié)果判斷:
繪制標準曲線:在Excel工作表中,以標準品濃度作橫坐標,對應OD值作縱坐標,繪制出標準品線性回歸曲線,按曲線方程計算各樣本濃度值
牛乙酰輔酶A羧化酶(ACC)ELISA檢測試劑盒操作注意事項:
1. 試劑盒保存在2-8℃,使用前室溫平衡20分鐘。從冰箱取出的濃縮洗滌液會有結(jié)晶,這屬于正?,F(xiàn)象,水浴加熱使結(jié)晶完全溶解后再使用。
2. 實驗中不用的板條應立即放回自封袋中,密封(低溫干燥)保存。
3. 濃度為0的S0號標準品即可視為陰性對照或者空白;按照說明書操作時樣本已經(jīng)稀釋5倍,最終結(jié)果乘以5才是樣本實際濃度。
4. 嚴格按照說明書中標明的時間、加液量及順序進行溫育操作。
5. 所有液體組分使用前充分搖勻。
實驗步驟:
1. 確定好空白孔,并在相應的微孔中加入100ul EIA緩沖液。
2. 確定好樣品對照孔,檢測樣品孔和標準品孔,然后分別將100ul樣品對照品、檢測樣品和稀釋好的標準品加入到相應的微孔中。
3. 蓋板,37℃孵育60min
4. 用洗瓶洗板,在微孔中加入洗滌液再浸泡15-30秒,棄取洗滌液。重復7次,*在吸水紙上拍干。如果是用洗板機洗板時,用洗板機洗四次后,再用洗瓶洗3次。
5. 每孔加入100ul酶標抗體。
6. 蓋板,4℃下溫育30min
7. 按照步驟4)洗板9次
8. 將所需量的顯色劑加入到試管中,然后每孔內(nèi)加入100ul顯色劑。為了避免污染,請勿將剩余試劑倒入顯色劑原裝瓶中。
9. 室溫避光溫育30min,加入顯色劑后溶液顏色會變成藍色
10. 每孔中加入100ul終止液,此時溶液顏色會變成黃色。
11. 除去包被板孔底的雜質(zhì)或水滴,同時確保液體表面無泡沫, 30min內(nèi)在450處讀取OD值。
注:本譯文由烜雅生物研究人員翻譯僅供參考,詳情請以原文為準。
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