建立檢測靜脈注射人血免疫球蛋白的抗補體活性的ELISA方法及其相應的標準品.方法用C1q包被酶標板,以辣根過氧化物酶標記的金黃色葡萄球菌蛋白A(SPA-HRP)作為酶標記物,鄰苯二胺為底物.結果應用ELISA法檢測靜脈注射用人免疫球蛋白抗補體活性具有準確性高(97.2%),精確性好(試驗內(nèi)精密度為6.7%,試驗間精密度為9.1%),特異性強,靈敏性高(測定限度為0.2ACA單位,測量限度為0.3ACA單位)等特點.結論ELISA法檢測抗補體活性簡便,快捷,準確.

      探討C3d與C3d-IC的測定方法及其與疾病的關系。方法:用抗人C3和抗人IgG r-球蛋白組份作為固相反應物.建立了檢測(23d及C3d-IC的ELISA法.并對各類疾病患者血清C3d與C3d-IC的水平進行了測定。結果:發(fā)現(xiàn)慢性腎炎、全身性紅斑狼瘡(SLE)、慢性乙型肝炎及肺炎患者血清中C3d總體水平均較對照組顯著增高,分別有58.5%~72.2%的患者C3d含量高于正常上限(P<0.01).且該類患者亦有較高的C3d—IC陽性檢出率(肺炎患者除外)。本研究表明,C3d—IC陽性者,其血清C3d含量均高于正常水平.二者具有顯著的相關性。結論:C3d—IC與補體的起始有直接關系,因而C3d—IC與C3d可以看作是疾病或組織損傷及補體活化反應的重要參考指標。

     為了更好地測定人血清中補體C3d片及荷C3d的免疫復合物,采用酶免疫吸附技術建立了測定C3d及荷C3dIC的方法,其敏感度為0.05mg/L,工作范圍為0.11-50mg/L,批內(nèi),批間CV分別為6.3%和8.8%,上率為97%

     探討腎炎患者補體時活化單核巨噬細胞 (CD16 + Mo MΦ)膜輔因子蛋白 (MCP)、促衰變因子 (DAF)及同種限制因子 2 0 (HRF 2 0 )表達水平。方法 :采用流式細胞術測定 136例腎小球腎炎患者血中CD16 + Mo MΦMCP、DAF和HRF 2 0表達水平 ,采用ELISA法測定血清C3d及荷C3d 免疫復合物的 (C3d IC)水平。結果 :MC病人血清C3d、C3d IC水平及血中CD16 + Mo MΦMCP、DAF、HFR 2 0表達水平與正常組無顯著差異 (P >0 0 5 ) ,GS、MN及PGN病人血清C3d水平、血中CD16 + Mo MΦMCP、DAF、HRF 2 0表達水平及MN、PGN病人C3d IC水平均顯著高于正常組 (P <0 0 1) ,且MCP、DAF、HRF 2 0表達水平與血清C3d水平呈顯著正相關 (P <0 0 1)。結論 :腎小球腎炎補體時血中CD16 + Mo MΦMCP、DAF、HRF 2 0表達水平顯著上調(diào) ,以保護CD16 + Mo MΦ不被的補體損傷。從而 ,CD16 + Mo MΦ浸潤腎組織并產(chǎn)生促炎作用 ,參于腎小球腎炎的發(fā)病及發(fā)展。

慢性乙型性肝炎患者需要長期,與目前效果欠佳和患者免疫無法完全控制復制有關。尋找預測療效的指標對于慢性乙型性肝炎患者的是十分必要的。既往研究報道發(fā)現(xiàn)前基線HBV DNA載量、HBsAg和HBeAg定量可以預測干擾素或核苷類的療效,但是它們均為反映患者體內(nèi)量的預測指標。最近,許多前基線核心抗體(Anti-HBc)水平可以有效預測干擾素和核苷類慢性乙型性肝炎患者的療效。Anti-HBc是針對乙肝核心抗原(HBcAg)的特異性抗體,其在慢性HBV感染患者中升高的原因,及其與HBcAg表達的關系未有明確報道。Anti-HBc水平與患者效果相關是因為其能反映機體針對HBV特異性免疫反應水平還是具有直接的功能,仍有待進一步探討。