南京博研生物科技有限公司
主營(yíng)產(chǎn)品: elisa試劑盒, 標(biāo)準(zhǔn)體, 抗體
博研生物-犬免疫球蛋白A(IgA)ELISA試劑盒
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南京博研生物科技有限公司 ELISA試劑盒在國(guó)內(nèi)有許多種叫法,例如:ELISA檢測(cè)試劑盒、ELISA Kit、酶聯(lián)免疫試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒、酶聯(lián)免疫分析試劑盒、酶免試劑盒等,比較常見(jiàn)的叫法是ELISA檢測(cè)試劑盒、酶聯(lián)免疫吸附測(cè)定試劑盒等。ELISA試劑盒自從60-70年代問(wèn)世以來(lái),得到全世界科研工作者的認(rèn)可及推崇,在歐美及中國(guó)獲得很大的推廣,尤其是國(guó)內(nèi)生化領(lǐng)域的長(zhǎng)足發(fā)展。Elisa生物試驗(yàn)是一種敏感性高,特異性強(qiáng),重復(fù)性好的實(shí)驗(yàn)方法。由于其試劑穩(wěn)定、易保存,操作簡(jiǎn)便,結(jié)果判斷較客觀等因素,已廣泛應(yīng)用在免疫學(xué)檢驗(yàn)的各領(lǐng)域中。ELISA檢測(cè)試劑盒適用于體外定性檢測(cè)人血清或血漿中的抗人類戊型肝炎(HEV) IgM 抗體ELISA檢測(cè)。
為對(duì)犬干擾素進(jìn)行研究,試驗(yàn)采用PCR法將犬IFN-α基因從基因組DNA克隆到pGEM—T載體,并進(jìn)行測(cè)序分析.結(jié)果表明:犬IFN-α1基因ORF大小為564bp,編碼187個(gè)氨基酸,前23個(gè)為信號(hào)肽;成熟蛋白理論分子質(zhì)量為19ku,等電點(diǎn)為6.217,有4個(gè)潛在磷酸化位點(diǎn),1個(gè)N糖基化位點(diǎn)和4個(gè)半胱氨酸殘基,大部分為親水區(qū);經(jīng)二級(jí),三級(jí)結(jié)構(gòu)預(yù)測(cè),該蛋白主要由5段儀螺旋組成;犬IFN—α1基因與貉子,赤狐的同源性,為98%,在進(jìn)化樹(shù)中處于同一分支;在干擾素多肽鏈中,15L,18L,77W,96L,99C,124F,131L,137S,140AWE142,145R和150R在所有分析物種中高度保守。
根據(jù)基因庫(kù)(CenBank)中收錄的犬α-干擾素(IFN- α)基因核苷酸序列(AB102731),設(shè)計(jì)并合成了1對(duì)引物,PCR擴(kuò)增京巴犬IFN-α全基因,并克隆,測(cè)序.結(jié)果表明,犬IFN-α基因全基因序 列為564 bp,包含1個(gè)開(kāi)放閱讀框,編碼187個(gè)氨基酸的多肽,推導(dǎo)氨基酸序列有3個(gè)潛在的N-糖基化位點(diǎn),有10個(gè)與二硫鍵形成有關(guān)的半胱氨酸.序列比較分析發(fā) 現(xiàn),京巴犬IFN-α基因序列與GenBank發(fā)表的其它品種犬IFN-α基因序列核苷酸同源性為96.3%以上,氨基酸同源性為94.1%以上,其中與 AB102731核苷酸同源性,為99.5%.僅有3個(gè)堿基差異.京巴犬與人和其他8種動(dòng)物的IFN-α基因序列分析和系統(tǒng)進(jìn)化分析表明,IFN-α 基因存在種屬的差異性,親緣關(guān)系越近,同源性越高.京巴犬IFN-α基因的成功克隆為進(jìn)一步研究犬IFN-α基因表達(dá),生物學(xué)活性和應(yīng)用奠定基礎(chǔ)。