產(chǎn)品名稱：斑節(jié)對蝦桿狀病毒(MBV)核酸檢測試劑盒(PCR法)

檢測方法： 實時熒光 PCR

規(guī)    格： 50T

保存方式： 2~8℃

有 效 期： 1年

產(chǎn)    地： 中國

用    途： 僅用于科研實驗

訂購流程：斑節(jié)對蝦桿狀病毒(MBV)核酸檢測試劑盒(PCR法)

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ELISA常見問題：斑節(jié)對蝦桿狀病毒(MBV)核酸檢測試劑盒(PCR法)

利用ELISA進(jìn)行檢驗常見的樣本一般包括血液（指血，靜脈血），尿，糞便，腦脊液，胸腹水，前列腺液，精液，陰道分泌物等，這些樣本收集的時間、方法和保存都有一定的要求。

1、抗原：ELISA抗原有三類：液體中純化的自然抗原、合成抗原和基因重組抗原。

純度不高可導(dǎo)致試劑盒的特異性不強，合成抗原一般都是多肽抗原，

試劑盒一般為基因重組抗原。抗原純度不高，特異性就不強，

2、抗體特異性和親和力的大小會影響試劑盒的特異性和敏感性

3、酶結(jié)合物，試劑盒的保存時間通常由酶的穩(wěn)定性決定。

最常用的就是辣根過氧化酶-HRP.其他還有堿性磷酸酶和β半乳糖苷酶。

ELISA溫浴和洗滌一般為磷酸鹽緩沖液（PBS）

堿性磷酸酶的話就不能用PBS洗滌了，因為殘留的PBS會抑制一半的酶活性。

TMB顯色液取代了OPD為HRP最常用的色原底物。為氧化還原反應(yīng)（OPD對機體有突變作用，所以改用TMB）

斑節(jié)對蝦桿狀病毒(MBV)核酸檢測試劑盒(PCR法)  【檢驗方法的局限性】

1. 當(dāng)檢測樣本中被檢核酸濃度低于本試劑盒的*檢出限時可能會發(fā)生假陰性的結(jié)果。

2. 被檢樣本在采集、運輸、儲存以及處理過程中操作方式不當(dāng)容易造成RNA降解而產(chǎn)生假陰性結(jié)果。

3. 樣本在采集、運輸、儲存以及處理過程中發(fā)生交叉污染，則容易得到假陽性結(jié)果。

實驗操作

1.模板制備（樣本制備區(qū)）
建議使用配套水生動物病毒基因組DNA/RNA提取試劑盒系列產(chǎn)品，具體過程詳見產(chǎn)品說明書。
2.添加模板（模板添加區(qū)，放置于冰盒上進(jìn)行）
剪下所需測試數(shù)的已含有反應(yīng)液的PCR管，放置在室溫待解凍后，離心30秒后揭開封口膜，向每管反應(yīng)液中分別加入5μL模板，順序為NG、待測樣品模板、PG-VH-P。蓋好配套的PCR管蓋后，渦旋混勻30s，離心1min，立即進(jìn)行PCR擴增反應(yīng)。
3. 擴增反應(yīng)（擴增及產(chǎn)物分析區(qū)）
使用熒光定量PCR儀，熒光基團(tuán)選擇FAM，淬滅基團(tuán)選擇TAMRA。