武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司
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亞細(xì)胞定位公司-洋蔥亞細(xì)胞定位公司-洋蔥亞細(xì)胞定位方法
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武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái);可以開展各類動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。
亞細(xì)胞定位是指某種蛋白或表達(dá)產(chǎn)物在細(xì)胞內(nèi)的具體存在部位。例如在核內(nèi)、胞質(zhì)內(nèi)或者細(xì)胞膜上存在。GFP是綠色熒光蛋白,在掃描共聚焦顯微鏡的激光照射下會(huì)發(fā)出綠色熒光,從而可以地定位蛋白質(zhì)的位置。
武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái);可以開展各類動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。
大豆是重要的油料作物和植物蛋白質(zhì)資源,在食品工業(yè)和農(nóng)業(yè)生產(chǎn)中占有重要地位。大豆花葉病毒病分布非常廣泛,是一種世界害,它嚴(yán)重影響大豆產(chǎn)量和外觀品質(zhì)。目前主要通過適當(dāng)改變播種時(shí)期、選用抗病品種、防蚜等措施來降低大豆花葉病毒(SMV)對(duì)大豆產(chǎn)量的影響,國內(nèi)外從遺傳工程角度來探索抗SMV途徑的還很少。類甜味蛋白(Thaumatin-like proteins,TLP)是第5類植物病程相關(guān)蛋白,在離體條件下具有很強(qiáng)的抑菌活性。以往關(guān)于類甜味蛋白的抗病研究都限于抗真菌,本研究探討了其與花葉病毒抗性之間的相關(guān)性。GmTLP是本研究從大豆品種科豐1號(hào)中利用SMV誘導(dǎo)的雙向電泳技術(shù)分離的類甜味蛋白編碼基因,在大豆中存在兩個(gè)拷貝,分別命名為GmTLP1和GmTLP2。本文對(duì)GmTLP1在植物中的表達(dá)及功能進(jìn)行了初步研究。研究結(jié)果如下:1實(shí)時(shí)熒光定量PCR結(jié)果顯示,在SMV誘導(dǎo)4h、8h、24h、48h時(shí),GmTLP1基因在轉(zhuǎn)錄水平上的表達(dá)量明顯上升,說明在mRNA水平上該基因是響應(yīng)SMV誘導(dǎo)的,并且響應(yīng)模式為雙峰模式。 2半定量RT-PCR結(jié)果顯示,GmTLP1在大豆根、莖、葉、莢中均有表達(dá),只是莢中表達(dá)量相對(duì)低一些。3構(gòu)建綠色熒光蛋白融合表達(dá)載體,利用根癌農(nóng)法轉(zhuǎn)化洋蔥表皮細(xì)胞進(jìn)行瞬時(shí)表達(dá)。
武漢思特進(jìn)科技發(fā)展有限公司成立于2007年,是一家以實(shí)驗(yàn)技術(shù)研發(fā)、實(shí)驗(yàn)產(chǎn)品研發(fā)、日化產(chǎn)品研發(fā)、實(shí)驗(yàn)項(xiàng)目承接為一體的高新技術(shù)公司;公司實(shí)驗(yàn)中心有分子生物學(xué)平臺(tái)、細(xì)胞平臺(tái)、光鏡平臺(tái)、植物組培平臺(tái)、原核蛋白表達(dá)平臺(tái)、日化產(chǎn)品生產(chǎn)平臺(tái);可以開展各類動(dòng)、植物、細(xì)菌、細(xì)胞等生物實(shí)驗(yàn)。
植物細(xì)胞壁抗降解屏障是限制秸稈生物質(zhì)資源化轉(zhuǎn)化利用的關(guān)鍵因素,而木質(zhì)纖維素的阿魏酸化是禾本科植物細(xì)胞壁抗降解屏障形成的重要分子基礎(chǔ)。植物阿魏?;D(zhuǎn)移酶(Feruloyl transferase)是負(fù)責(zé)將阿魏酸從阿魏酰CoA轉(zhuǎn)移至阿拉伯木聚糖分子上的關(guān)鍵酶之一,在阿拉伯木聚糖與木質(zhì)素的連接上起到關(guān)鍵作用,與植物細(xì)胞壁抗降解屏障的形成關(guān)系十分密切,因此對(duì)阿魏酰基轉(zhuǎn)移酶基因開展研究將可以為禾本科能源植物開發(fā)利用以及農(nóng)作物秸稈的再生利用提供新的思路。本文對(duì)禾本科模式植物二穗短柄草(Brachypodium distachyon)中的一個(gè)可能的阿魏?;D(zhuǎn)移酶基因Bra1進(jìn)行研究,其主要研究結(jié)果如下:1.以二穗短柄草成熟莖組織mRNA為材料,采用RT-PCR技術(shù)得到了Bra1(5g14720)基因的全長cDNA序列,其序列大小為1369 bp,生物信息學(xué)分析表明該基因的開放閱讀框(ORF)編碼443個(gè)氨基酸殘基,其編碼蛋白質(zhì)的理論分子質(zhì)量為48.45 kDa。進(jìn)一步的基因原核表達(dá)以及蛋白質(zhì)譜分析也表明該基因的開放閱讀框能正確編碼一個(gè)BAHD?;D(zhuǎn)移酶蛋白,其分子量大小與理論值基本一致。2.Bra1編碼蛋白的氨基酸序列中包含有BAHD酰基轉(zhuǎn)移酶家族特有的HXXXD功能區(qū)以及DFGWG保守結(jié)構(gòu)域,說明Bra1基因是BAHD?;D(zhuǎn)移酶基因家族的一個(gè)成員。