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乙酰輔酶A測試盒測定意義

測定意義

乙酰輔酶A廣泛存在于動物、植物、微生物和培養(yǎng)細胞中。是生物體能源物質(zhì)代謝過程中產(chǎn)生的一種重要的中間代謝產(chǎn)物。在體內(nèi)能源物質(zhì)代謝中是一個樞紐性的物質(zhì)。糖、脂肪、蛋白質(zhì)三大營養(yǎng)物質(zhì)通過乙酰輔酶A匯聚成一條共同的代謝通路-三羧酸循環(huán)和氧化磷酸化，經(jīng)過這條通路徹底氧化生成二氧化碳和水，釋放能量用于ATP合成。此外，乙酰輔酶A是合成脂肪酸，酮體，膽固醇及其衍生物等生理活性物質(zhì)的前體物質(zhì)。

測定原理

蘋果酸脫氫酶可催化蘋果酸和NAD生成草酰乙酸和NADH。檸檬酸合酶可催化乙酰輔酶A和草酰乙酸生成檸檬酸和輔酶A。利用蘋果酸脫氫酶和檸檬酸合酶的偶聯(lián)反應(yīng)，乙酰輔酶A含量和NADH的生成速率成正比，340nm下吸光值的上升速率反應(yīng)了乙酰輔酶A含量的高低。

需自備的儀器和用品

紫外分光光度計/酶標(biāo)儀、水浴鍋、臺式離心機、可調(diào)式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研缽、冰和蒸餾水。

提取液：液體×1瓶，4℃保存。 
試劑一：液體×1瓶，4℃保存。 
試劑二：粉劑×1瓶，4℃保存。臨用前加入2.6mL試劑一，充分震蕩溶解。 
試劑三：粉劑×1瓶，4℃保存。臨用前加入2.6mL試劑一，充分震蕩溶解。 
操作步驟：
一、粗酶液提?。?span lang="EN-US">
1.組織：按照組織質(zhì)量（g）：提取液體積(mL)為1：5~10的比例（建議稱取約0.1g組織，加入1mL提取液）進行冰浴勻漿，8000g 4℃離心10min，取上清液待測。
2.細菌、真菌：按照細胞數(shù)量（104個）：提取液體積（mL）為500~1000：1的比例（建議500萬細胞加入1mL提取液），冰浴超聲波破碎細胞（功率300w，超聲3秒，間隔7秒，總時間3min）；然后8000g，4℃，離心10min，取上清置于冰上待測。
3.血清等液體：直接測定。
二、測定操作： 
1.分光光度計預(yù)熱30 min，調(diào)節(jié)波長到412 nm，蒸餾水調(diào)零。 
2.試劑二置于37℃水浴中預(yù)熱30min。 
3.空白管：取1mL玻璃比色皿，依次加入100μL蒸餾水、800 μL試劑一、50μL試劑二和50 μL試劑三，迅速混勻，于412nm處測定3min內(nèi)吸光值變化，第10s吸光值記為A1，第190s吸光值記為A2。△A空白管=A2－A1 
4.測定管：取1mL玻璃比色皿，依次加入100μL上清液、800 μL試劑一、50μL試劑二和50 μL試劑三，，迅速混勻，于412nm處測定3min內(nèi)吸光值變化，第10s吸光值記為A3，第190s吸光值記為A4。△A測定管=A4-A3 

乙酰輔酶A測試盒產(chǎn)品優(yōu)點如下：
1、快速簡便：雙試劑，96孔板直接操作，快速、簡便。
2、取樣量微：需要的樣本量是羥胺法的1/10。
3、靈敏度高：檢測線0.5U/ml，是羥胺法5倍，鄰苯三酚法的200倍
4、穩(wěn)定性好：批內(nèi)CV=5.50%,批間CV=3.32%，試劑盒2～8℃存放3個月有效。
5、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.2%。
6、回收試驗： X =102.3%。
7、受外界影響因素?。焊蓴_因素少，重復(fù)性強。且特異性強，不受類SOD物質(zhì)的干擾
8、測試面廣：可測動物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細胞、細菌、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等，效果均佳。

乙酰輔酶A測試盒產(chǎn)品售后有保障、品質(zhì)無憂    高保障    品質(zhì)現(xiàn)貨

1.嚴(yán)格的質(zhì)量控制：嚴(yán)格檢測每一批產(chǎn)品，確保產(chǎn)品穩(wěn)定性，靈敏度。
2.專業(yè)的產(chǎn)品包裝：適應(yīng)產(chǎn)品特性的包裝，確保運輸?shù)陌踩院痛鎯Φ挠行?span lang="EN-US">
3.秉持“客戶購買我們的產(chǎn)品就是收獲一份價值，一份安心的信念，竭誠提供優(yōu)質(zhì)產(chǎn)品，售后服務(wù)無優(yōu)