簡(jiǎn)介
中性粒細(xì)胞趨化因子-1（CINC-1）是由IL-1β刺激大鼠腎上皮細(xì)胞（NRK-52E）純化得來(lái)的，富山醫(yī)學(xué)院的Watanabe's團(tuán)隊(duì)在1989年確定了大鼠CINC-1的氨基酸序列，屬于趨化因子α（CXC）亞單位的一員，另外三個(gè)大鼠的CXC趨化因子也已證實(shí)（CINC-2 α；CINC-2β；CINC-3/MIP-2）；CINC-1蛋白序列63-67%與INC-2α；CINC-2β；CINC-3/MIP-2相似；另外GROα, GROβ和GROγ與CINC-1的一致性分別為67%，71%，69%；因此表明大鼠CINCs與人GROs的一致性

實(shí)驗(yàn)原理

此試劑盒根據(jù)酶免法的夾心原理，利用兩種不同的高特異性抗體，TMB作為著色劑，顏色強(qiáng)度與大鼠的GRO/ CINC-1的量成正比

檢測(cè)范圍

4.69~300pg/ml

預(yù)期用途
此試劑盒可用于血清，EDTA血漿和細(xì)胞上清中GRO/ CINC-1的定量檢測(cè)
重組的和天然的IL-8都可以用此試劑盒檢測(cè)

試劑盒組成
1. 包被板，96孔，包被有抗大鼠GRO/ CINC-1兔IgG
2. 標(biāo)記抗體酶聯(lián)物，0.4ml，30倍濃縮，HRP標(biāo)記抗大鼠GRO/ CINC-1兔IgG Fab'
3. 標(biāo)準(zhǔn)品，0.5mlx2，重組大鼠GRO/ CINC-1
4. EIA緩沖液，30ml，1%BSA ,含0.05%吐溫20的PBS
5. 標(biāo)記抗體稀釋液，12mlx1,1%BSA，含0.05%吐溫20的PBS
6. 著色劑，15mlx1，TMB底物液
7. 終止液，12mlx1，1N硫酸
8. 洗滌緩沖濃縮液，50mlx1, 40X，含0.05%吐溫20的磷酸緩沖液

實(shí)驗(yàn)所需器材但試劑盒未提供

• 酶標(biāo)儀（450nm）
• 移液器和槍頭
• 燒杯
• 蒸餾水
• 坐標(biāo)紙（對(duì)數(shù)-對(duì)數(shù)）
• 吸水紙
• 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋管
• 洗瓶
• 一次性試驗(yàn)管

試劑準(zhǔn)備

• 洗滌緩沖液制備：先將洗滌濃縮液平衡至室溫，充分混勻，然后吸取50ml濃縮液與1950ml的去離子水混勻，即得。配制的洗滌液應(yīng)保存于冰箱內(nèi)，并于2周內(nèi)用完
• 標(biāo)記抗體的制備：用標(biāo)記抗體稀釋液將標(biāo)記抗體稀釋30倍，即得。例：如果只測(cè)一條板，8孔，則需要標(biāo)記抗體800ul（30ul的標(biāo)記抗體+870ul的標(biāo)記抗體稀釋液，混勻，使用時(shí)每孔加100ul）

   此步驟在實(shí)驗(yàn)前完成
   剩余的標(biāo)記抗體濃縮應(yīng)裝于密封瓶?jī)?nèi)，保存在4℃

• 標(biāo)準(zhǔn)品的制備：吸取0.5ml的去離子水至標(biāo)準(zhǔn)品瓶?jī)?nèi)，充分混勻，得到600pg/ml的大鼠GRO/ CINC-1標(biāo)準(zhǔn)品
• 標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋：準(zhǔn)備8個(gè)試管用于標(biāo)準(zhǔn)品的稀釋，每管加入230ul的EIA緩沖液

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