小鼠卵巢顆粒細(xì)胞【MouseOvary:NormalOvaryGranuleCells】
產(chǎn)品描述：主要功能為產(chǎn)生性激素，并且與相關(guān)的生長(zhǎng)因子相互作用促進(jìn)卵母細(xì)胞的發(fā)育。公司提供的小鼠卵巢顆粒細(xì)胞，采用膠原酶消化制備而來。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司專利產(chǎn)品小鼠卵巢顆粒細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒(MouseOvaryPrimaCell:NormalOvaryGranuleCellsCatNo.3-4344)來優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞（如脂肪細(xì)胞、纖維細(xì)胞等）的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，小鼠卵巢顆粒細(xì)胞傳3-5代仍可以保持原代細(xì)胞的分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。
公司提供的原代細(xì)胞均來自新鮮組織，公司提供的小鼠源原代細(xì)胞均來自新鮮組織，用于培養(yǎng)該細(xì)胞的組織采集是根據(jù)國(guó)際標(biāo)準(zhǔn)方案進(jìn)行。細(xì)胞的培養(yǎng)采用公司PrimaCellTM原代細(xì)胞培養(yǎng)試劑盒來優(yōu)化目的細(xì)胞生長(zhǎng)條件，以降低雜細(xì)胞的污染，同時(shí)保證質(zhì)量的穩(wěn)定。在公司生物技術(shù)部標(biāo)準(zhǔn)的操作流程下，原代細(xì)胞可以保持分化狀態(tài)，進(jìn)而可以用于評(píng)估體外藥物模型系統(tǒng)和調(diào)節(jié)特定基因的遺傳功能。

細(xì)胞培養(yǎng)操作規(guī)程：
一．培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準(zhǔn)備：
1）準(zhǔn)備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640：GIBCO，貨號(hào)21875-091)，90%；優(yōu)質(zhì)胎牛血清，10%。
2）培養(yǎng)條件： 氣相：空氣，95%；二氧化碳，5%。 溫度：37℃，培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
3）凍存液：90%血清，10%DMSO，現(xiàn)用現(xiàn)配，液氮儲(chǔ)存。
二．細(xì)胞處理：
1）復(fù)蘇細(xì)胞：將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中（水面要低于凍存管蓋部）搖晃解凍，移入事先準(zhǔn)備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘，棄去上清液，加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。第二天換液并檢查細(xì)胞密度。
2）細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá)80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
對(duì)于懸浮細(xì)胞，傳代可參考以下方法：
方法一：收集細(xì)胞，1000RPM，常溫條件下離心5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻，將細(xì)胞懸液按1：2到1：5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。

注意事項(xiàng)：
1. 接收到小鼠卵巢顆粒細(xì)胞，肉眼觀察細(xì)胞培養(yǎng)基顏色，顯微鏡觀察細(xì)胞生長(zhǎng)情況，并對(duì)細(xì)胞進(jìn)行不同倍數(shù)拍照（建議收到時(shí)的培養(yǎng)瓶拍一張照片，顯微鏡拍收到時(shí)的細(xì)胞100X,200X各一張）。
2.用75%的酒精消毒（建議配置75%的酒精的水是滅菌過的）。
3.嚴(yán)格無菌操作，打開細(xì)胞培養(yǎng)瓶。
4.將細(xì)胞培養(yǎng)瓶?jī)?nèi)的培養(yǎng)基用吸管完全吸出（嚴(yán)禁直接傾倒），放入另一無菌容器中（建議換新的培養(yǎng)基培養(yǎng)細(xì)胞）。
5.用PBS 2-3ml/次輕輕洗細(xì)胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,顯微鏡下觀察細(xì)胞變圓，輕輕拍打培養(yǎng)瓶直到細(xì)胞脫落，加入終止液終止。
6.1000rpm，5min離心，重懸細(xì)胞。
7.換新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶，37℃，5%CO2培養(yǎng)。
以下是公司正在熱銷的產(chǎn)品：
人胚肝二倍體細(xì)胞;CCC-HEL-1 人支氣管上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基 100mL環(huán)1酰胺（標(biāo)準(zhǔn)品）Cyclophosphamide質(zhì)量規(guī)格：HPLC>99%,標(biāo)準(zhǔn)品

人肺支氣管癌細(xì)胞;NCI-H1650氨1汀硫醇二鹽酸Amifostine Thiol Dihydrochloride

CD40 Others Cynomolgus 食蟹猴 / 恒河猴 CD40 / TNFRSF5 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 貝那普利游離堿Benazepril Free base

A172人膠質(zhì)母細(xì)胞瘤細(xì)胞 A172 human glioblastoma cells DMEM+10% FBS拉莫三嗪-13C3Lamotrigine-13C3

CRT細(xì)胞，神經(jīng)膠質(zhì)瘤細(xì)胞 曲霉 人海馬趾星形膠質(zhì)細(xì)胞RNAHA-h miRNA5 μgD-半乳糖醛酸甲酯D-Galacturonic acid methyl ester
PCSK9 Others Rat 大鼠 PCSK9 / NARC1 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 鹽酸羅格列酮（標(biāo)準(zhǔn)品）rosiglitazone hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：HPLC法含量測(cè)定

原代滑膜皮細(xì)胞培養(yǎng)特制添加劑Many types of cells包裝：5/2.5/1ml苯溴馬隆（標(biāo)準(zhǔn)品）BENZBROMARONE質(zhì)量規(guī)格：含量測(cè)定

MAP2K2 Others Human 人 MEK2 / MAP2K2 / MKK2 桿狀病毒-昆蟲細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 鹽酸布替萘芬（標(biāo)準(zhǔn)品）Butenafine HCl質(zhì)量規(guī)格：HPLC法含量測(cè)定

敘利亞倉鼠腎細(xì)胞;BHK-21鹽酸托烷司瓊（標(biāo)準(zhǔn)品）Tropisetron hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：HPLC>98%,標(biāo)準(zhǔn)品

Neuro-2A細(xì)胞，腦神經(jīng)瘤細(xì)胞 人肝癌細(xì)胞,HepG2.2.1.5細(xì)胞 CM-M130小鼠肝外膽管上皮細(xì)胞完全培養(yǎng)基100mL鹽酸托烷司瓊Tropisetron hydrochloride質(zhì)量規(guī)格：>98%,BR
RAW 264.7細(xì)胞，小鼠單核巨噬細(xì)胞白血病細(xì)胞 溶組織梭菌Closidium histolyticum 水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;WB-S3熒光素100克

CCL22 Protein Human 重組人 CCL22 / MDC 蛋白 (His 標(biāo)簽)5-氧基-2-本并咪坐 99% 5-Mqthoxy-2-mqrccptobqnzimidczolq 3702-78-1

PA317(小鼠成纖維細(xì)胞) 5×106cells/瓶×2 食蟹猴 CD1E & B2M Heterodimer 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) RIBOREADY100BRNALADDERRNA laddeTFrozen

人低分化肺腺癌細(xì)胞;GLC-82 [GLC82]血清兔抗HRPshēng huà shì jì容量：100克

人毛發(fā)基質(zhì)細(xì)胞(HHZMC)( 5×105 )PseudomonasIsolationAgar 500g原裝 BD 292710
小鼠卵巢顆粒細(xì)胞心肌細(xì)胞Many types of cells包裝：5 ×105方(1ml)TRICInepUFFERTRICINE BUFFER蛋白組學(xué)級(jí)100G5704-4-1RT

MCF7細(xì)胞，人癌細(xì)胞 人導(dǎo)管癌細(xì)胞,HCC38細(xì)胞 髓核細(xì)胞生長(zhǎng)添加物NPCGS(-)-表沒食子醋兒茶速(+4℃) (-)-qpigcllocctqchin 970-74-1

水牛皮膚成纖維樣細(xì)胞;WB-S3標(biāo)樣 Lqcd 7439/9/1

IL1RAPL2 Others Human 人 IL1R9 人細(xì)胞裂解液 (陽性對(duì)照) 4-Chloromercuribenzoicacid對(duì)錄高本酸500克AR，99%

非洲綠猴腎細(xì)胞系/HCV-E1;Vero-HCV-E1GDX 203(聚二本多孔小球)NA
操作要點(diǎn)：
1）將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱；準(zhǔn)備一個(gè)15mL無菌的離心管，加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
2）將凍存細(xì)胞從液氮罐中取出，快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫（可準(zhǔn)備一潔凈的燒杯，裝滿37℃的水，細(xì)胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi)，再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中）。輕輕晃動(dòng)凍存管，使細(xì)胞能在1~2min內(nèi)完全解凍，使細(xì)胞能盡快通過最易受損的溫度段（-5~0℃）。注意凍存管管口不能沒入水中，BRL(大鼠肝細(xì)胞)避免引起污染。
3）用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺(tái)內(nèi)，將管內(nèi)細(xì)胞轉(zhuǎn)移至準(zhǔn)備好的離心管內(nèi)，輕輕吹打液體，使細(xì)胞均勻分散，降低DMSO濃度，吹打時(shí)避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次，均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
4）800rpm離心5min，棄上清，加入新鮮的培養(yǎng)基，吹打制成細(xì)胞懸液。
5）將細(xì)胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細(xì)胞瓶?jī)?nèi)，補(bǔ)加適量的培養(yǎng)基，輕輕晃動(dòng)細(xì)胞瓶使細(xì)胞分布均勻，放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
6）第二天觀察細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)情況，換新鮮培養(yǎng)基以去除死細(xì)胞。繼續(xù)培養(yǎng)，待細(xì)胞長(zhǎng)至80~90%匯合時(shí)正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細(xì)胞需經(jīng)過2~3次傳代，細(xì)胞活力恢復(fù)后才能進(jìn)行后續(xù)的實(shí)驗(yàn)。