產(chǎn)品及特點(diǎn): 

因此快速靈敏檢測(cè)阿古尼嗜血桿菌具有重要意義。本產(chǎn)品就是為此目的根據(jù) PCR 原理開發(fā)的試劑盒，阿古尼嗜血桿菌LAMP試劑盒50次它具有下列特點(diǎn)：

1. 即開即用，用戶只需要提供 DNA 模板。

2. 引物經(jīng)過精心優(yōu)化，專一性強(qiáng)，只擴(kuò)增阿古尼嗜血桿菌，與其他植物沒有交叉反應(yīng)。

3. 提供陽性對(duì)照，便于區(qū)分假陰性樣品。

4. PCR mix 中含上樣染料，PCR 后可以直接上樣電泳。

5. 本試劑盒足夠做 40μL 體系的 PCR 50 次，但只能用于科研。

操作步驟：

1：樣品準(zhǔn)備：取1毫升細(xì)胞培養(yǎng)上清（貼壁和懸浮細(xì)胞都可以,*已培養(yǎng)48小時(shí)以上），在16000g離心5分鐘，小心棄去上清，避免丟失沉淀（沉淀量有可能很少，目視看不到）。將沉淀用無菌PBS重懸，在16000g離心5分鐘，同樣小心棄去上清，如此反復(fù)用無菌PBS洗三次。*將獲得的沉淀用100微升超純水重懸，置于100℃水浴中孵育5分鐘。如此制備好的樣品可在4℃保存1到2個(gè)月。

2：PCR反應(yīng)的準(zhǔn)備：

待各組份融化后先瞬時(shí)離心，然后輕彈混勻。按下表在已滅菌的PCR管中配制反應(yīng)體系，每次實(shí)驗(yàn)需加一個(gè)陰性和一個(gè)陽性對(duì)照，測(cè)試反應(yīng)管可以有多個(gè)。配制過程中應(yīng)注意無菌，戴口罩，并注意避免操作產(chǎn)生的氣溶膠造成樣品間的交叉污染，推薦在有風(fēng)壓的設(shè)備如超凈臺(tái)或生物安全柜中進(jìn)行操作。建議配制完畢后瞬時(shí)離心以使液體沉至管底。

檢測(cè)特異性與靈敏度:

高性能的UNICONTM Taq熱啟動(dòng)酶及組分優(yōu)化的反應(yīng)體系保證高度的特異性擴(kuò)增，提升了擴(kuò)增效率，使得UNICONTM qPCR Master Mix具有極高的檢測(cè)靈敏度。以人293T細(xì)胞cDNA為模板，在相同條件下擴(kuò)增低拷貝hbcl6基因，與同類產(chǎn)品相比，UNICONTM qPCR Master Mix具有更好的擴(kuò)增特異性、更高的擴(kuò)增效率及更好的復(fù)孔重復(fù)性，檢測(cè)靈敏度更高。

注意事項(xiàng):

1. 建議使用新鮮采取的動(dòng)物組織，若為長(zhǎng)期冷凍組織，應(yīng)盡量避免反復(fù)凍融，否則會(huì)導(dǎo)致模板的降解，影響PCR效率。

2. 試劑Buffer AL若低溫保存，易產(chǎn)生沉淀。在使用前務(wù)必將其在室溫中放置一段時(shí)間，也可在37℃水浴中預(yù)熱10 min，以溶解沉淀，混勻后再使用。

3. 電泳檢測(cè)時(shí)，切勿使用含有SDS的Loading Buffer。否則，電泳時(shí)會(huì)在泳道中出現(xiàn)一大團(tuán)拖尾亮帶，影響實(shí)驗(yàn)結(jié)果。

4. 建議擴(kuò)增片段長(zhǎng)度1 kb以內(nèi)，以便擴(kuò)增效率佳。

5. 為了您的安全和健康，請(qǐng)穿實(shí)驗(yàn)服并佩戴一次性手套操作。

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