封閉毛細(xì)線蟲PCR檢測試劑盒
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封閉毛細(xì)線蟲PCR檢測試劑盒

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上海一研生物科技有限公司

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商品參數(shù)
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商品介紹
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用途范圍 僅用于科研
純度 98%%
產(chǎn)地 進(jìn)口、國產(chǎn)
品牌 上海一研
規(guī)格 50T
貨號 EY00P253
是否進(jìn)口
商品介紹

準(zhǔn)備物品:

清理液(A)                                   毫升

染色液(t B)                                   微升

稀釋液(C)                                   毫升

溶解液(tD)                                   毫升

產(chǎn)品說明書                                   1份

            產(chǎn)品名稱

               英文名稱

                規(guī)格

封閉毛細(xì)線蟲PCR檢測試劑盒

Capillaria obsignataPCR

                  50T

普通PCR反應(yīng)流程:

組成及試劑配制:

1、酶標(biāo)板:一塊(96孔)

2、 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品): 2瓶,請臨用前15分鐘內(nèi)配制。每瓶以樣品稀釋液稀釋至0.5ml,蓋好后室溫靜置大約10分鐘,同時反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為200 U/L,然后做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋),分別配制成200 U/L,100 U/L,50 U/L,25 U/L,12.5 U/L,6.25 U/L,3.12 U/L,樣品稀釋液直接作為空白孔 0 U/L。如配制100 U/L標(biāo)準(zhǔn)品:取0.3ml (不要少于0.3ml )200 U/L的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.3ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。

3、 樣品稀釋液:1×20ml。

4、 檢測稀釋液A:1×10ml。

5、 檢測稀釋液B:1×10ml。

反應(yīng)五要素:

封閉毛細(xì)線蟲PCR檢測試劑盒參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+

引物:引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列, 就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:

①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。

②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。

③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC*隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。

④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3'端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。

⑤引物3'端的堿基,特別是最末及倒數(shù)第二個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。

⑥引物中有或能加上合適的酶切位點, 被擴(kuò)增的靶序列*有適宜的酶切位點, 這對酶切分析或分子*很有好處。

⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。

引物量:每條引物的濃度0.1~1umol或10~100pmol,以*引物量產(chǎn)生所需要的結(jié)果為好,引物濃度偏高會引起錯配和非特異性擴(kuò)增,且可增加引物之間形成二聚體的機(jī)會。

使用方法    

1 實驗所需器材與試劑

1.1 器材

1)PCR儀

2)PCR反應(yīng)管

3)電泳儀及水平電泳槽

4)高速離心機(jī)

5)微量移液器及移液器吸頭

1.2 試劑

1)瓊脂糖

2)EB(溴化乙錠)

3)去離子水或雙蒸水

注意事項:   

5.1使用本試劑前請仔細(xì)閱讀本說明書全文。

5.2 操作時應(yīng)盡量少說話,因口腔中也含有支原體,可能引起樣品污染,而造成假陽性;整個檢測過程中,反應(yīng)體系的配制、樣本處理及加樣、PCR擴(kuò)增應(yīng)分區(qū)域進(jìn)行,以避免交叉污染。 5.3 實驗時,試劑盒組分中的試劑使用前應(yīng)充分融化并混勻(混勻時禁止激烈振蕩,只需要進(jìn)行上下倒置多次進(jìn)行混勻)。

5.4 反應(yīng)管中加好所有的試劑后,應(yīng)盡快上PCR儀進(jìn)行擴(kuò)增,以免形成過多的二聚體。

5.5細(xì)胞培養(yǎng)物中含有青霉素和鏈霉素等抗生物素不會影響本品的檢測結(jié)果。如果用戶需要進(jìn)一步提高檢測靈敏度,建議細(xì)胞在不含青霉素和鏈霉鏈等抗生素中進(jìn)行培養(yǎng)2-3天后送樣檢測。

"別 名 C13orf3; RAMA1; SKA3; SKA3_HUMAN; Spindle and kinetochore associated complex subunit 3; Spindle and kinetochore-associated protein 3.

濃 度 1mg/1ml

規(guī) 格 0.2ml/200μg

抗體來源 Rabbit

*類型 polyclonal

交叉反應(yīng) Human, Mouse, Rat, Chicken, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

產(chǎn)品類型 一抗

研究領(lǐng)域 細(xì)胞生物 細(xì)胞周期蛋白 細(xì)胞分化

蛋白分子量 predicted molecular weight:

46kDa  

性 狀 Lyophilized or Liquid

免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human SKA3

亞 型 IgG

純化方法 affinity purified by Protein A

儲 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4

產(chǎn)品應(yīng)用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500

(石蠟切片需做抗原修復(fù))

not yet tested in other applications.

optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.

保存條件 Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C."

封閉毛細(xì)線蟲PCR檢測試劑盒人環(huán)加氧酶2(COX-2)Elisa Kit(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Lathyrol 10mg

人環(huán)孢素A(CsA)Elisa Kit(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Notopterol 5mg

人踝蛋白(talin)Elisa Kit(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Hydroxysafflor yellow A 10mg

人花生四烯酸5脂加氧酶(ALOX-5)Elisa Kit(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Madecassoside 5mg

人花生四烯酸(AA)Elisa Kit(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Madecassic acid 1g

人紅細(xì)胞生成素受體(EPOR)Elisa Kit(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Purpurin 1g

人紅細(xì)胞生成素(EPO)Elisa Kit(化學(xué)發(fā)光免疫分析法) pinocembrin 250mg

人紅細(xì)胞膜蛋白(EMP)Elisa Kit(化學(xué)發(fā)光免疫分析法)Solanesol 1g


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公司名稱 上海一研生物科技有限公司
聯(lián)系賣家 汪小姐 (QQ:3004994300)
電話 ῧῨῡ-ῠῥῥῢῤῡῠῥ
手機(jī) ῡῤῧῨῡΰῠῧῢῢΰ
地址 上海市閔行區(qū)