ECL發(fā)光液

適用于：P1000    P1010   P1020   P1030   P1050   P1060

描述：ECL發(fā)光液可用于直接或間接檢測與辣根過氧化物酶HRP關(guān)聯(lián)的蛋白或核酸底物。普利萊是國內(nèi)最早推出ECL化學(xué)發(fā)光液的民族品牌，使用普利萊ECL化學(xué)發(fā)光產(chǎn)品發(fā)表的SCI論文文章影響因子超過5000分。經(jīng)過不斷研發(fā)升級，普利萊目前擁有中、強(qiáng)、極強(qiáng)全系列發(fā)光液，與國外進(jìn)口品牌相比，品質(zhì)好，價格優(yōu)，不論高豐度蛋白、低豐度蛋白，總有一款適合您！

用途：適于全自動化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)和HRP標(biāo)記探針的核酸雜交。

儲存：4 ℃密封避光保存 九個月有效

安全性：無特殊毒性，按普通化學(xué)品處理。

使用方法:

1. 常規(guī)電泳、轉(zhuǎn)膜、HRP標(biāo)記抗體或核酸探針孵育、洗膜。注意用HRP標(biāo)記lgG或用一抗-鏈親和素-生物素-HRP夾法。核酸雜交膜用HRP標(biāo)記探針雜交，洗膜。

2. 洗滌膜上的HRP標(biāo)記二抗時，配制新鮮發(fā)光工作液：分別取等體積的溶液A和B混合，放置使之升到室溫。建議立即使用工作液，室溫放置數(shù)小時后仍可使用但靈敏度略有降低。

3. 用鑷子取出膜，搭在濾紙上瀝干洗液但勿使膜完全干燥。將膜完全浸入并與發(fā)光工作液(0.125ml發(fā)光工作液/cm2膜)充分接觸。準(zhǔn)備立即使用全自動化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)掃描。孵育時間過長不會增加靈敏度，有時還會導(dǎo)致曝光條帶異常。發(fā)光過程的本質(zhì)是酶促反應(yīng)，使用過少的發(fā)光工作液不利于反應(yīng)進(jìn)行，也會導(dǎo)致膜上條帶曝光不均，明顯降低靈敏度。為達(dá)節(jié)約目的可將膜剪小但勿降低發(fā)光液用量。

4. 用鑷子夾起膜，搭在濾紙上瀝干發(fā)光工作液。但勿洗去發(fā)光液。

5. 全自動化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)掃描。

注意事項：

1. 步驟1-5可在日光燈下操作；但發(fā)光液曝露于強(qiáng)光下時間過久靈敏度可能略有降低。戴手套可以避免在膜上留下手印。

2. 蛋白過量，將加深背景并使條帶強(qiáng)弱變化失去線性關(guān)系。

3. 發(fā)光工作液孵育約1分鐘后膜上的條帶發(fā)光。強(qiáng)條帶發(fā)光在暗房中肉眼可見，低豐度蛋白條帶發(fā)光較弱甚至肉眼不可見但可全自動化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)掃描。如果曝光后條帶不佳，可用洗膜緩沖液洗膜，重新孵育二抗，然后重新用ECL發(fā)光。

4. 由于不同發(fā)光液的靈敏度，選擇合適的抗體稀釋濃度，進(jìn)行孵育!

5. 某些市售保鮮膜包裹印跡膜時會淬滅熒光，應(yīng)選擇高質(zhì)量保鮮膜，例如“克林萊”牌子保鮮膜。

6. 暗室曝光時，使用肉眼可見的熒光-放射自顯影曝光標(biāo)簽(#P2010)可幫助確定膠片上條帶的準(zhǔn)確位置和大小。

7. NaN3能抑制HRP活性，回收第二抗體應(yīng)避免使用NaN3，如必需使用勿超過0.01%。